AOD 9604 kukuniBu sintetik peptid preparati boʻlib, inson oʻsish gormoni (hGH)ning C-terminal qismi (176-191 aminokislotalar) asosida ishlab chiqilgan boʻlib, asosan yogʻ almashinuvini tartibga solish va vaznni boshqarish uchun ishlatiladi. Uning asosiy molekulyar formulasi C78H123N23O23S2 bo'lib, molekulyar og'irligi 1815,1 Da va CAS 221231-10-3. U kimyoviy sintez orqali tayyorlangan va tozaligi 98% dan yuqori. Ushbu dori yog 'emirilishini rag'batlantirishi, yog 'almashinuvini tartibga solish va yog' ishlab chiqarishni inhibe qilishi mumkinligi sababli, odamlar o'zlaridan ko'ra ko'proq yog' va kaloriyalarni yoqishlari mumkin. Oddiy ovqatlanish va jismoniy mashqlar bilan solishtirganda, odamlar qisqa vaqt ichida ko'proq vazn yo'qotishlarini sezadilar. Ular vazn yo'qotish uchun HGH qo'shimchalaridan foydalanganda, ular odatda ba'zi odamlarga qaraganda kamroq yon ta'sirlarni sezishi mumkin.
Bizning mahsulot shakli
AOD 9604 COA
AOD 9604 sun'iy ravishda sintez qilingan peptid birikmasi bo'lib, u asosan inson o'sish gormoni (hGH) ning C{2}}terminal hududidan (aminokislotalar 176-191) olingan 15 ta aminokislotalar qoldiqlaridan iborat peptid fragmentidir. Ushbu molekula semizlikni davolash, jismoniy mashqlar bilan ovqatlanish va qarishga qarshi sohalarda hGH ning lipolitik funktsional sohalarini aniq ushlash, mustaqil metabolik tartibga solish omillarini shakllantirish orqali noyob qiymatni namoyish etdi.
Molekulyar formula va molekulyar og'irlik
Molekulyar formulasi C78H123N23O23S2, aniq molekulyar og'irligi 1815,1 Da. Uning tuzilishi ikkita sistein qoldig'idan (Cys182 va Cys189) iborat bo'lib, ular disulfid bog'lari (- S-S -) orqali siklik tuzilma hosil qiladi. Bu konformatsion barqarorlik molekulaning fermentativ gidrolizga chidamliligini sezilarli darajada oshiradi va in vivo{13}}yarim umrini uzaytiradi.
Aminokislotalar ketma-ketligi va funktsional domenlari
To'liq ketma-ketlik SALLRSIPPAGASRLLLLLTGEIDLP. ular orasida
Lavozimlar 176-185 (SALLRSIPAP):
3-adrenergik retseptorning (3-AR) bog'lovchi domenini tashkil eting, bu katexolamin gormonlarining konformatsiyasini taqlid qilish orqali lipoliz signalizatsiya yo'lini faollashtiradi;
Lavozimlar 186-191 (AGASRL):
Preadipotsitlar differentsiatsiyasini bloklaydigan peroksizoma proliferator faollashtirilgan retseptorlari gamma (PPAR gamma) inhibitiv ketma-ketligini o'z ichiga oladi;
Disulfid halqa hududi (Cys182-Cys189):
Molekulaning uch oʻlchovli tuzilishini saqlaydi{0}}, bu maqsadli oqsil bilan yuqori darajada bogʻlanishini taʼminlaydi.
Fizikaviy va kimyoviy xossalari
Eruvchanligi:
Dimetil sulfoksidda (DMSO) ozgina eriydi va foydalanish uchun maxsus konsentratsiyali eritma tayyorlash kerak;
Barqarorlik:
Kukun yorug'likdan himoyalangan holatda saqlanishi kerak va peptid zanjirining uzilishiga olib keladigan qayta-qayta muzlash-eritish sikllarining oldini olish uchun -20 daraja muzlatishning optimal sharoiti;
PH:
Prognoz qilingan pKa qiymati 3,49 ± 0,10 ni tashkil etadi, bu uning hujayra membranasi orqali tashish uchun qulay bo'lgan fiziologik pH (7,4) muhitida manfiy zaryadga ega ekanligini ko'rsatadi.
AOD 9604 kukuniva AOD9401, inson o'sish gormoni (hGH) ning lipolitik domen analoglari sifatida, ikkalasi ham hGH ning C-terminal fragmentini taqlid qilish orqali yog 'almashinuvini tartibga soladi. Biroq, molekulyar tuzilish, ta'sir kuchi, ta'sir mexanizmi va klinik qo'llash potentsiali jihatidan ikkalasi o'rtasida sezilarli farqlar mavjud. Qiyosiy tahlil quyidagi to'rtta o'lchov bo'yicha amalga oshiriladi:
Molekulyar tuzilmani optimallashtirish: AOD9604 ning "aniq kesish"
AOD9401, erta ishlab chiqilgan hGH analogi sifatida, hGH ning C-uchida 176 - 191 aminokislota fragmentini saqlaydi, 30 ta aminokislota qoldiqlarini o'z ichiga oladi. AOD9604 shu asosda yanada optimallashtirilib, kimyoviy modifikatsiya yoki fragmentlarni ajratib olish usullari orqali yanada barqaror siklik disulfid bog'lanish strukturasini (masalan, C7 → C14 sayt siklizatsiyasi) hosil qiladi, molekulyar barqarorlik va bioavailability sezilarli darajada yaxshilanadi.
Ushbu tuzilmaviy optimallashtirish uning yarim umrini in vivo uzaytiradi, bu esa yog 'to'qimasi to'sig'iga kirib borishni osonlashtiradi va og'iz orqali yoki in'ektsiyadan keyin maqsadli hujayralarga bevosita ta'sir qiladi. Misol uchun, Zuk semizlik kalamush modelida AOD9604 19 kun davomida tana vaznining kilogrammiga 500 mikrogram dozada og'iz orqali yuborilgan, natijada nazorat guruhiga nisbatan vazn ortishi 50% ga kamaygan, AOD9401 esa xuddi shu dozada atigi 30% ga kamaygan, bu mokulyar darajada samaraliroq ekanligini ko'rsatadi.
Harakatning kuchi: AOD9604 "ikki tomonlama mustahkamlash"
Lipolitik faollik: AOD9604 adipotsitlardagi 3-adrenergik retseptorlarni faollashtiradi, hujayra ichidagi siklik adenozin monofosfat (cAMP) darajasini sezilarli darajada oshiradi, shu bilan protein kinaz A (PKA) va gormonga sezgir lipazani (HSL) faollashtiradi, trilyoz kislotasi va trilyotseridning erkin gidrolizlanishini tezlashtiradi. Eksperimental ma'lumotlar shuni ko'rsatdiki, AOD9604 bilan davolash qilingan semiz kalamushlarda yog 'to'qimalarining lipolitik faolligi nazorat guruhiga nisbatan 2,3 baravar, AOD9401 esa atigi 1,5 barobar oshdi.
Antilipogen ta'sir: AOD9604 yog 'kislotasi sintazasining (FAS) ifodasini inhibe qilishi, preadipotsitlarning etuk adipotsitlarga differensiallanishini blokirovka qilishi va yog'siz oziq-ovqat moddalarining tana yog'iga aylanishini kamaytirishi mumkin. Kollagenaz tomonidan qo'zg'atilgan quyon tizzasi osteoartriti modelida, qo'shma xaftaga degeneratsiyasi ko'rsatkichi AOD9604 bilan birgalikda gialuron kislotasi in'ektsiyasi bilan davolash qilingan guruhda, faqat AOD9401 bilan davolash qilingan guruhga qaraganda sezilarli darajada past bo'lib, yog 'birikmasini kamaytirish orqali qo'shma bosimni kamaytirishdagi rolini bilvosita aks ettiradi.
AOD9604 molekulyar tuzilmani optimallashtirish, ta'sir kuchini oshirish, maqsadli mexanizmlardagi yutuq va ko'p stsenariy ilovalar uchun potentsial tufayli AOD9401-dan har tomonlama ustundir. Semirib ketishga qarshi peptid gormonlarining yangi avlodi sifatida u nafaqat vazn yo'qotish samaradorligini oshiribgina qolmay, balki semizlik, sport jarohatlari va qo'shma kasalliklarni davolash uchun yanada yaxshi echimlarni ta'minlab, xavfsizlik va funksionallikda sifatli pog'onaga erishadi.
Sintez jarayoni va sifat nazorati
1. Qattiq fazali peptid sintezi (SPPS) texnologiyasi
Asosiy ishlab chiqarish Fmoc/tBu himoya strategiyasi bilan qattiq{0}}fazali sintez usulini qabul qiladi:
Qatronlar tashuvchini tanlash:
C{0}}terminal amidatsiyasi o'zgarishini ta'minlash uchun Vang qatroni yoki Rink amid qatronini tanlang;
Bosqichma-bosqich ulanish:
Aminokislotalarni kondensator sifatida HBTU/DIPEA dan foydalanib, C{0}}terminalidan N-terminusgacha ketma-ket qo'shing;
Yon zanjirni himoya qilish guruhlari:
Sistein Trt tomonidan himoyalangan, arginin Pbf tomonidan nojo'ya reaktsiyalarning oldini olish uchun himoyalangan;
Kesish va tozalash:
Trifloroasetik kislota (TFA) bilan kesilgandan so'ng, teskari fazali yuqori samarali suyuqlik xromatografiyasi (RP-HPLC) tozalash orqali tozalik 99% dan oshishi mumkin.
2. Sifat standarti tizimi
Tozalik sinovi:
HPLC tahlili shuni ko'rsatadiki, asosiy tepalik maydoni ulushi 98% dan katta yoki unga teng, va bitta nopoklik 0,5% dan kam yoki teng;
Molekulyar og'irlikni tekshirish:
Mass-spektrometriya (MS) tomonidan aniqlangan haqiqiy molekulyar og'irlik va nazariy qiymat o'rtasidagi og'ish 0,1% dan kam yoki unga teng;
Qoldiq erituvchi nazorati:
TFA qoldig'i 0,1% dan kam yoki teng, asetonitril qoldig'i 50 ppm dan kam yoki teng;
Mikrob chegarasi:
Xitoy farmakopeyasining steril sinov talablariga javob berishi kerak.
ning kashfiyotiAOD 9604 kukuniSemizlikka qarshi xavfsiz va samarali dori yaratish uchun molekulyar biologiya texnikasi, farmakologik tajribalar va klinikadan oldingi tadqiqotlarni birlashtirgan-inson o‘sish gormoni (hGH) funktsional qismlari bo‘yicha chuqur tadqiqotlardan kelib chiqadi. Quyida uning kashfiyot jarayonining batafsil tavsifi keltirilgan:
Inson o'sish gormoni (hGH) oldingi gipofiz bezidan ajralib chiqadigan polipeptid gormoni bo'lib, o'sishni rag'batlantirish va metabolizmni tartibga solish kabi turli xil fiziologik funktsiyalarga ega. Biroq, hGH ning to'liq molekulasi qisqa yarim umr va yuzaga kelishi mumkin bo'lgan nojo'ya ta'sirlar kabi klinik ilovalarda cheklovlarga ega. Shu sababli, olimlar xavfsizroq va samaraliroq dori-darmonlarni ishlab chiqish uchun hGH ning funktsional qismlarini o'rganishni boshladilar. Shu nuqtai nazardan, hGH ning C-terminal fragmenti (aminokislotalar 176-191) yog 'almashinuvini tartibga solishdagi muhim roli tufayli tadqiqot maydoniga kirdi.
Olimlar kimyoviy sintez yoki genetik muhandislik texnikasi orqali hGH 176-191 fragmentini tayyorladilar va uning funksiyasi bo‘yicha chuqur tadqiqotlar o‘tkazdilar. Tajribalar shuni ko'rsatdiki, bu fragment lipolizni (lipolizni) rag'batlantirishi va adipogenezni (antilipogenez) inhibe qilishi mumkin, bu mushaklar va suyaklar kabi boshqa to'qimalarga minimal ta'sir qiladi. Ushbu kashfiyot semizlikka qarshi yangi dori-darmonlarni ishlab chiqish uchun muhim maslahatlar beradi. Keyingi tadqiqotlar hGH 176-191 fragmentining ta'sir qilish mexanizmini aniqladi, bu triglitseridlarning glitserin va yog 'kislotalariga gidrolizlanishini rag'batlantirish uchun adipotsitlar membranasidagi 3-adrenergik retseptorlarni faollashtiradi va shu bilan lipolitik faollikni oshiradi; Shu bilan birga, yog 'kislotasi sintazasining (FAS) ifodalanishini inhibe qilish, preadipotsitlar differentsiatsiyasini va yog' kislotasi sintezini blokirovka qilish va manbadan yog' to'planishini kamaytirish.
HGH 176-191 fragmentining tadqiqot natijalariga asoslanib, olimlar kimyoviy sintez usuli orqali AOD 9604 ni tayyorladilar. Bu jarayon aminokislotalarning bosqichma-bosqich ulanishi, himoya guruhlarini olib tashlash va tozalash kabi bosqichlarni o'z ichiga oladi, natijada yuqori toza AOD 9604 peptidiga olib keladi. hGH 176-191 fragmenti bilan solishtirganda, uning barqarorligini, biologik mavjudligini yoki samaradorligini oshirish uchun uning kimyoviy tuzilishida ma'lum optimallashtirishlar qilingan bo'lishi mumkin. Masalan, aminokislotalar ketma-ketligini o'zgartirish yoki ma'lum kimyoviy guruhlarni kiritish orqali aminokislotalarning antienzimatik qobiliyati.AOD 9604 kukuniyaxshilanishi mumkin, bu esa uning yarim-in vivo umrini uzaytiradi.
Semizlikka qarshi ta'sirni tekshirish uchun olimlar hayvonlar ustida bir qator tajribalar va klinikadan oldingi tadqiqotlarni o'tkazdilar. Hayvonlarda o'tkazilgan tajribalarda yog 'to'planishini sezilarli darajada kamaytirishi, yog'larning parchalanishini rag'batlantirish va semirish bilan bog'liq metabolik ko'rsatkichlarni yaxshilash (masalan, qon glyukoza, qon lipidlari va boshqalar) isbotlangan. Bundan tashqari, u yaxshi xavfsizlikni namoyish etdi va tajriba hayvonlarining jigari va buyragi kabi muhim organlarga sezilarli toksik ta'sir ko'rsatmadi. Klinikadan oldingi tadkikotlar doza-javob munosabatlari va ta'sir mexanizmi yanada aniqlangan. Masalan, gen ekspresyonini tahlil qilish va proteomika kabi usullar yordamida olimlar uning adipotsit signalizatsiya yo'lidagi tartibga soluvchi rolini ochib berishdi va uni klinik qo'llash uchun ilmiy dalillarni taqdim etishdi.
1. Toksikologik baholash
O'tkir toksiklik:
Oral LD ₅₀>sichqonlarda 5000 mg/kg, amalda zaharli bo'lmagan-;
Genetik toksiklik:
Ames testi va sichqonchaning suyak iligi mikronukleus testi ham salbiy;
Uzoq muddatli toksiklik:
Kalamushlar 90 kun davomida jigar va buyraklar faoliyatida hech qanday anormalliksiz yoki organ vaznidagi o'zgarishlarsiz doimiy ravishda qo'llanildi.
2. Klinik tadqiqotlarning rivojlanishi
Semirib ketishni davolash:
II bosqich klinik sinovlari shuni ko'rsatdiki, har kuni 1 mg AOD 9604 ni og'iz orqali qabul qiladigan semiz odamlar (BMI 35 dan katta yoki teng) 12 haftadan so'ng o'rtacha 2,8 kg yo'qotadi, bu platsebo guruhidan (0,8 kg) sezilarli darajada yaxshi;
Sport jarohatlarini tuzatish:
Quyon tizzasi osteoartriti modelida xaftaga regeneratsiyasi yaxshilandi va artikulyar inyeksiyadan keyin xaftaga qalinligi 41% ga oshdi;
Metabolik sindromga aralashuv:
Energiya balansini optimallashtirish, insulin qarshiligini yaxshilash va ochlikdagi qon glyukoza darajasini 15% ga kamaytirish orqali.
Issiq teglar: aod 9604 kukuni, Xitoy aod 9604 kukuni ishlab chiqaruvchilari, etkazib beruvchilari
